Comparison of indirect ELISA based on recombinant protein NcSRS2 and IFAT for detection of Neospora caninum antibodies in sheep / Comparação entre ELISA baseado no antígeno recombinante NcSRS2 e RIFI para detecção de anticorpos de Neospora caninum em ovinos

Neospora caninum, an Apicomplexan parasite that can causes abortion, is responsible for considerable economic and reproductive losses in livestock. The purpose of the present study was to determine whether recombinant NcSRS2 is a suitable indirect ELISA antigen for determining specific immune response to N. caninum in sheep. A total of 441 serum samples were subjected to IFAT and rNcSRS2 based-ELISA, with both tests performing similarly. The sensitivity and specificity of indirect ELISA were 98.6 and 98.3 percent, respectively. The kappa index shows 0.98 concordance between the two tests, which is considered excellent. Seroprevalences of 30.8 and 32.0 percent were detected by IFAT and indirect ELISA, respectively, showing these tests did not differ significantly on this measure (p > 0.05). Serological analysis showed that HisG tag was detected by Western Blotting recognizing rNcSRS2 protein. The potential value of rNcSRS2-based ELISA as a highly specific and sensitive tool for serological diagnosis is also supported by the strong agreement found between IFAT and ELISA. The results support the potential use of recombinant protein NcSRS2 as an antigen in indirect ELISA in sheep.

Neospora caninum é um parasito Apicomplexa que pode causar abortos e é reconhecido como agente importante responsável por perdas econômicas e reprodutivas. Este estudo avaliou a proteína recombinante NcSRS2 como antígeno para ELISA indireto na determinação de resposta imune para N. caninum em ovinos. 441 amostras de soro foram analisadas por IFAT e ELISA indireto com rNcSRS2 e ambos os testes revelaram comportamento similar. A sensibilidade e especificidade de ELISA indireto foram 98,6 e 98,3 por cento, respectivamente. O índice kappa mostrou uma concordância entre os dois testes com valor de 0,98, que é considerado excelente. Prevalências de 30,8 e 32,0 por cento detectadas por IFAT e ELISA indireto, respectivamente, mostraram que os testes não diferiram significativamente nesse aspecto (P > 0.05). A análise sorológica revelou que os anticorpos específicos da cauda de histidina reconheceu por Western Blotting a proteína recombinante NcSRS2. O valor potencial do ELISA indireto baseado no antígeno rNcSRS2 como ferramenta altamente específica e sensível para diagnóstico sorológico é também reforçado pela alta concordância dos valores obtidos com IFAT e com ELISA indireto. Esses resultados respaldam o uso potencial da proteína rNcSRS2 como antígeno em ELISA indireto em ovinos.

Condição microbiológica de cama tratada com Impact P® em matrizes de frangos de corte / Broiler breeder microbiological litter condition following treatment with Impact P®

Foram avaliados os efeitos da aplicação de Impact P® sobre a cama de aviário de matrizes de corte mediante o monitoramento de parâmetros microbiológicos. O Impact P® é um produto formulado através de Bacillus subtillis e suas enzimas que atuam sobre os dejetos animais e matéria orgânica, utilizando-os como fonte alimentar, visando melhorar as condições da cama dentro de aviários. Na 58ª semana de idade das matrizes foi trocado todo material de cama e então aplicados os seguintes tratamentos: T1- controle; T2 - Impact P® na dosagem de 2,5gm-2 de cama; T3 - Impact P® na dosagem de 5,0g m-2 de cama. Foram realizadas contagens de enterobactérias totais em agar McConkey em amostra de cama nova e após 3, 10, 17, 24 e 31 dias de uso da cama pelas aves e tratamentos com Impact P®. A análise estatística foi realizada no procedimento General Linear Models - GLM que utiliza o método dos quadrados mínimos, em um esquema fatorial 3x4 (tratamento x tempo de uso da cama) em delineamento completamente casualizado, com quatro repetições por tratamento, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey. A dosagem de 5,0g de Impact P® por m² de cama foi eficiente para reduzir em aproximadamente 13% a contagem logarítmica total de enterobactérias em comparação com o grupo não tratado (2,89 versus 3,31log10 (UFC), respectivamente, P<0,05).

This study aimed to evaluate the utilization of Impact P® in used litter from floor pens of broiler breeders through the monitoring of microbiological parameters. Impact P® is a commercial product obtained from Bacillus subtillis and it enzymes. Using animal litter and organic matter as a feed source, the product was designed to improve the quality of floor pens of broiler breeders. When hens aged 58 weeks, all used floor pens material was replaced with a new one and the following treatments were tested: T1 - control; T2 - 2.5g Impact P® m-2 litter; T3- 5.0g Impact P® m-2 litter. Counting of number of enterobacterium colonies in agar Mac-ConcKey was performed in a sample of new floor pens material and after 3, 10, 17, 24 and 31 days of litter treatment with Impact P®. The statistical analysis was accomplished with the General Linear Models - GLM procedure, using the minimum square method in a 3x4 factorial (treatment vs. time of floor pens utilization), in a completely randomized design with four replications. The averages were compared by Tukey test. The utilization of 5.0g Impact P® m-2 litter was efficient to reducing approximately 13% logarithmic total counting of the enterobacterium in comparison to the untreated group (2.89 versus 3.31log10 (CFU), respectively, P<0.05).